Esterilización

Se denomina esterilización al proceso validado por medio del cual se obtiene un producto libre de microorganismos viables. El proceso de esterilización debe ser diseñado, validado y llevado a cabo de modo de asegurar que es capaz de eliminar la carga microbiana del producto o un desafío más resistente.

Dado que la esterilidad no puede demostrarse de manera absoluta sin causar la destrucción completa de todas las unidades del lote de producto terminado, se define la esterilidad en términos probabilísticos, en donde la probabilidad de que una unidad de producto esté contaminada es aceptablemente remota. Se considera que un producto crítico es estéril cuando la probabilidad de que un microorganismo esté presente en forma activa o latente es igual o menor de 1 en 1.000.000 (coeficiente de seguridad de esterilidad 10^-6).

Los agentes que matan microbios son denominados microbicidas (cida= “matar”) o más comúnmente denominados “germicidas”. Si el agente específicamente destruye bacterias, es llamado bactericida; si mata hongos es denominado fungicida. Como sea después de exponer el objeto esterilizado al aire o a sus alrededores, éste otra vez se habrá contaminado con microorganismos

Propósitos de la autoclave

El autoclave es un equipo diseñado con el fin de eliminar, de forma confiable, los microorganismos de otra manera estarían presentes en objetos que se utilizan en actividades de diagnóstico, tratamiento, o investigación en instituciones de salud-hospitales, laboratorios-; también es un equipo de amplio uso en las industrias procesadoras de alimentos y en las industrias farmacéuticas. En el laboratorio los materiales y elementos se esterilizan con los siguientes fines:

 

1.    preparar e equipo a ser usado en cultivos bacteriológicos, tubos de ensayo, pipetas, platos, Petri, etc.), a fin de evitar que se encuentren contaminados

2.    Preparar elementos utilizados en la toma de muestra. (todos deben estar en condición estéril: agujas, tubos, recipientes)

3.    Esterilizar material contaminado

 

Las autoclaves se encuentran disponibles en muchos tamaños, los más pequeños son los de sobremesa y los más grandes, equipos complejos que requieren gran cantidad de preinstalaciones para su operación. Para medir su tamaño, por lo general, se toma como referencia el volumen de la cámara de esterilización, que se mide en decímetros cúbicos o en litros. Dependiendo de la forma en que se controla su operación, es posible encontrar manuales, semiautomáticos o totalmente automáticos.  

Autoclave

Una autoclave es un recipiente de presión metálico de paredes gruesas con un cierre hermético que permite trabajar a alta presión para realizar una reacción industrial, una cocción o una esterilización con vapor de agua. Su construcción debe ser tal que resista la presión y temperatura desarrollada en su interior. La presión elevada permite que el agua alcance temperaturas superiores a los 100 °C. La acción conjunta de la temperatura y el vapor produce la coagulación de las proteínas de los microorganismos, entre ellas las esenciales para la vida y la reproducción de éstos, cosa que lleva a su destrucción.

En el ámbito industrial, equipos que funcionan por el mismo principio tienen otros usos, aunque varios se relacionan con la destrucción de los microorganismos con fines de conservación de alimentos, medicamentos, y otros productos.

La palabra autoclave no se limita a los equipos que funcionan con vapor de agua ya que los equipos utilizados para esterilizar con óxido de etileno se denominan de la misma forma.

 Los procesos asociados para lograr que un objeto inanimado esté en condiciones estériles son los siguientes:

·         Limpieza

·         Descontaminación

·         Inspección

·         Preparación y empaque

·         Esterilización

·         Almacenamiento

·         Entrega de materiales

PRACTICA 13:

Reconocimiento de material para la esterilización y medios de cultivo.

 Manejo de la autoclave

Objeto de aprendizaje.

·         Manejo de autoclave

Competencia:

q  Identificara y describirá las partes de autoclave y su funcionamiento

q  Aplicar la técnica del uso de la autoclave

Fundamento:

La autoclave es el equipo que se utiliza para esterilizar. Por esterilizar se entiende la destrucción o eliminación de toda forma de vida microbiana, incluyendo esporas, presente en objetos inanimados mediante procedimientos físicos, químicos o gaseosos .La palabra esterilizador proviene de la palabra latina sterilis que significa no dar fruto. La autoclave donde más se utiliza es en establecimientos de salud, laboratorios clínicos y de investigación y salud pública. A dichos equipos también se les conoce como esterilizadores. La esterilización debe considerarse como un conjunto de procesos interrelacionados de enorme importancia para que puedan prestarse los servicios de salud; esterilización de materiales, medios de cultivo, instrumentos, dentro de las condiciones rigurosas de asepsia.

Los procesos asociados para lograr que un objeto inanimado esté en condiciones de estériles son los siguientes:

1.    Limpieza.

2.    Descontaminación.

3.    Inspección.

4.    Preparación y empaque.

5.    Esterilización.

6.    Almacenamiento.

7.    Entrega de materiales.

Determinación de cenizas en alimentos

Procedimiento:

1. Poner a masa constante un crisol de porcelana, perfectamente limpio, introduciéndolo a la mufla a 550°C ± 25°C aproximadamente, durante una hora; extraer el crisol de la mufla e introducirlo a una estufa a 125°C ± 5°C, durante al menos 15 minutos. Pasar el crisol al desecador y dejar enfriar hasta temperatura ambiente.
2. Determinar la masa del crisol en balanza analítica con aproximación de miligramos. Registrar el dato como A.
3. Tomar una muestra representativa de dos gramos previamente secada y determinar la masa del crisol con la muestra en balanza analítica con aproximación a miligramos. Registrar el dato como B.
4. Incinere la muestra utilizando un mechero hasta que no emita humo y las paredes del crisol estén blancas.
5. Introducir el crisol, con la muestra  calcinada, a la mufla a 550°C ± 25°C aproximadamente, durante una hora; extraer el crisol de la mufla e introducirlo a una estufa a 125°C ± 5°C, durante al menos 15 minutos. Pasar el crisol al desecador y dejar enfriar hasta temperatura ambiente.
6. Determinar el peso del crisol y del espécimen calcinado en balanza analítica con aproximación de miligramos. Registrar el valor como C.

constituyentes y operacion del desecador

Constituyentes

El compartimiento inferior del desecador contiene terrones de cal viva recién calcinada o cloruro de calcio calcinado para absorber los vapores de agua. La sustancia se pone en el compartimiento superior. El borde de vidrio esmerilado de la tapa desecador debe ser engrasado a fondo con una capa delgada de vaselina funden juntos con cera de abejas o cera de parafina.

Con el fin de abrir el desecador y sin daños, quitar la tapa horizontalmente hacia los lados no hacia arriba. Cubrir el desecador de la misma manera.

 

Operación

En uso de laboratorio, los desecadores más comunes son circulares y están hechas de vidrio pesado. Por lo general, una plataforma desmontable en la que se colocan los elementos que se almacenan. El desecante, por lo general una de otro modo inerte sólido tal como gel de sílice, llena el espacio debajo de la plataforma.

Una llave de paso puede ser incluido para permitir que el desecador a ser evacuado. Tales modelos son generalmente conocidos como desecadores de vacío. Cuando el vacío se va a aplicar, es una práctica común para entrecruzado el desecador de vacío con cinta, o para colocarlo detrás de una pantalla para minimizar el daño o perjuicio causado por una implosión. Para mantener un buen sellado, grasa de vacío se aplica generalmente a las bridas

 

Desecador

Un desecador es un instrumento de laboratorio que se utiliza para mantener limpia y deshidratada una sustancia por medio del vacío.

Está fabricado con un vidrio muy grueso y en él se distinguen dos cavidades, la primera cavidad más grande y superior, permite poner a secar la sustancia, y la otra cavidad inferior se usa para poner el desecante, más comúnmente gel de sílice.
También posee un grifo de cierre o llave de paso en su parte lateral o en la tapa, que permite la extracción del aire para poder dejarlo al vacío.
Al estar sellado al vacío la tapa siempre es difícil de volver a abrir.
El desecador se compone por un vidrio fuerte y otras veces puede ser hecho en porcelana.